W Atlas Antibodies zawsze intensywnie pracowaliśmy nad walidacją przeciwciał i produkcją wysoko scharakteryzowanych przeciwciał, którym nasi klienci mogą zaufać.
Wszystkie nasze przeciwciała są rygorystycznie oceniane pod względem specyficzności i wydajności oraz charakteryzowane w kilku zastosowaniach. Druga warstwa walidacji, Enhanced Validation, jest przeprowadzana zgodnie z zaleceniami International Working Group for Antibody Validation (IWGAV ) opublikowanymi w Nature Methods. Czytaj dalej, aby poznać koncepcje Wzmocnionej Walidacji i dowiedzieć się, jak te metody są stosowane w celu zapewnienia specyficzności naszych przeciwciał.
Charakteryzacja i walidacja przeciwciał
Projektowanie antygenów
W przypadku naszych przeciwciał, specyficzność zaczyna się od projektu. Przeciwciała są opracowywane przeciwko rekombinowanym ludzkim znacznikom epitopu białkowego (PrESTs) o długości od około 50 do 150 aminokwasów. Sekwencje PrEST są zaprojektowane tak, aby miały najniższą możliwą identyczność z innymi ludzkimi białkami.
Macierz białkowa
Swoistość i czystość są potwierdzone przez macierz białkową wobec 364 ludzkich rekombinowanych fragmentów białek.
Weryfikacja funkcji i charakterystyka
Wszystkie poliklonale Triple A i monoklonale PrecisA oferowane przez Atlas Antibodies są zwalidowane i scharakteryzowane w każdym zastosowaniu, do którego określone przeciwciało jest zatwierdzone (IHC, ICC-IF, WB), w większości normalnych i nowotworowych tkanek ludzkich, jak również na poziomie subkomórkowym. Każdemu przeciwciału towarzyszy duża liczba obrazów w Human Protein Atlas przedstawiających wyniki tych testów walidacyjnych, z których każdy jest ręcznie opisywany przez badaczy. W IHC, każde przeciwciało jest oceniane w 44 normalnych tkankach i 20 najczęściej występujących nowotworach.
- Dowiedz się więcej o charakteryzacji i walidacji w IHC, WB i ICC-IF.
Zatwierdzenie przeciwciała
Swoistość przeciwciała jest dalej oceniana, a ostateczne zatwierdzenie uwzględnia literaturę, dane bioinformatyczne i dane sekwencjonowania RNA.
Przejrzystość
Wierzymy, że przejrzystość i otwarty dostęp są kluczowe dla badań. Wszystkie dane dotyczące charakterystyki, w tym obrazy, są prezentowane na stronach internetowych Atlas Antibodies i Human Protein Atlas. W przeciwieństwie do większości dostawców przeciwciał, podajemy dokładną sekwencję immunogenu użytego do wyhodowania przeciwciała.
Wzmocniona walidacja
W dodatku do obszernej walidacji i charakterystyki zawsze wykonywanej dla naszych przeciwciał, przeprowadzamy wzmocnioną walidację specyficzną dla danego zastosowania. Wzmocniona walidacja jest zgodna z wytycznymi zaproponowanymi przez Międzynarodową Grupę Roboczą ds. Walidacji Przeciwciał (IWGAV) w Nature Methods.
Grupa robocza została utworzona przez wybitnych naukowców z całego świata w celu „sformułowania najlepszych podejść do walidacji przeciwciał używanych w powszechnych zastosowaniach badawczych i dostarczenia wytycznych zapewniających odtwarzalność przeciwciał. „1 IWGAV zaproponowała pięć filarów koncepcyjnych walidacji przeciwciał, które mają być stosowane w sposób specyficzny dla danego zastosowania. Przynajmniej jeden z filarów musi być zastosowany, aby przeciwciało zostało zwalidowane w określonym zastosowaniu. W Atlas Antibodies, bazujemy na interpretacji tych filarów przez Human Protein Atlas, wyjaśnionej tutaj.
Learn about Enhanced Validation
Wzmocniona walidacja oferuje zwiększone bezpieczeństwo specyficzności przeciwciała w określonym kontekście. Jest to zapewnione przez zastosowanie najbardziej odpowiedniej metody walidacji dla każdej kombinacji białka, próbki i zastosowania.
Dowiedz się więcej
Reprodukowalność
Oprócz przeprowadzenia dokładnej walidacji, kluczowe znaczenie ma zapewnienie odtwarzalności przeciwciał. Każda nowa partia przeciwciała musi działać tak samo w porównaniu do poprzedniej partii, aby eksperymenty z użyciem przeciwciała mogły być powtarzane z takimi samymi wynikami. W Atlas Antibodies testujemy wszystkie nowe partie przeciwciał równolegle z istniejącymi partiami na dużym zestawie próbek.
- Dowiedz się, jak zapewniamy odtwarzalność przeciwciał
1 Grupa wybitnych naukowców z Uniwersytetu Stanforda, Uniwersytetu Yale, MIT, UCSD i NIH w USA, Uniwersytetu Toronto w Kanadzie, EMBL w Niemczech, Uniwersytetu Niigata w Japonii i Science for Life Laboratory w Szwecji, została utworzona w celu opracowania formalnych wytycznych dotyczących walidacji przeciwciał i odtwarzalności, które mają być stosowane przez producentów przeciwciał w celu walidacji przeciwciał w ustandaryzowany sposób (Nature Methods, wrzesień 2016).