V Atlas Antibodies jsme vždy intenzivně pracovali na validaci protilátek a na výrobě vysoce charakterizovaných protilátek, kterým mohou naši zákazníci důvěřovat.
Všechny naše protilátky jsou přísně hodnoceny z hlediska specifičnosti a účinnosti a jsou charakterizovány v několika aplikacích. Druhá úroveň validace, rozšířená validace, se provádí podle doporučení Mezinárodní pracovní skupiny pro validaci protilátek (IWGAV ) zveřejněných v časopise Nature Methods. Pokračujte ve čtení, abyste se seznámili s koncepty rozšířené validace a s tím, jak jsou metody používány k zajištění specifičnosti našich protilátek.
Charakterizace a validace protilátek
Design antigenů
U našich protilátek začíná specifičnost již při návrhu. Protilátky jsou vyvíjeny proti rekombinantním lidským proteinovým epitopovým značkám (PrEST) o délce přibližně 50 až 150 aminokyselin. Sekvence PrEST jsou navrženy tak, aby měly co nejnižší identitu s jinými lidskými proteiny.
Protein Array
Specifičnost a čistota jsou ověřeny pomocí proteinového pole proti 364 fragmentům lidských rekombinantních proteinů.
Funkční validace a charakterizace
Všechny polyklonální protilátky Triple A a monoklonální protilátky PrecisA nabízené společností Atlas Antibodies jsou validovány a charakterizovány v každé aplikaci, pro kterou je konkrétní protilátka schválena (IHC, ICC-IF, WB), ve většině normálních a nádorových lidských tkání i na subcelulární úrovni. Každá protilátka je doprovázena velkým množstvím obrázků na Human Protein Atlas zobrazujících výsledky těchto validačních testů, přičemž každý z nich je ručně komentován výzkumnými pracovníky. Při IHC je každá protilátka hodnocena ve 44 normálních tkáních a 20 nejčastějších nádorových onemocněních.
- Zjistěte více o charakterizaci a validaci v IHC, WB a ICC-IF.
Schválení protilátky
Specifičnost protilátky je dále hodnocena a konečné schválení zohledňuje literaturu, bioinformatická data a data sekvenování RNA.
Transparentnost
Věříme, že transparentnost a otevřený přístup jsou pro výzkum klíčové. Všechna charakterizační data včetně obrázků jsou uvedena na webových stránkách Atlasu protilátek a Atlasu lidských proteinů. Na rozdíl od většiny dodavatelů protilátek vám poskytujeme přesnou sekvenci imunogenu použitého ke zvýšení protilátky.
Rozšířená validace
Kromě rozsáhlé validace a charakterizace, která se vždy provádí u našich protilátek, provádíme rozšířenou validaci specifickou pro dané aplikace. Rozšířená validace se řídí pokyny navrženými Mezinárodní pracovní skupinou pro validaci protilátek (IWGAV) v časopise Nature Methods.
Tuto pracovní skupinu vytvořili významní výzkumní pracovníci z celého světa, aby „formulovali nejlepší přístupy k validaci protilátek používaných v běžných výzkumných aplikacích a poskytli pokyny, které zajistí reprodukovatelnost protilátek. „1 IWGAV navrhla pět koncepčních pilířů pro validaci protilátek, které se mají používat v závislosti na aplikaci. Aby mohla být protilátka validována v konkrétní aplikaci, musí být použit alespoň jeden z pilířů. Ve společnosti Atlas Antibodies vycházíme při rozšířené validaci z interpretace těchto pilířů provedené společností Human Protein Atlas, která je vysvětlena zde.
Poznejte rozšířenou validaci
Rozšířená validace nabízí zvýšenou bezpečnost specifičnosti protilátek v definovaném kontextu. To je zajištěno použitím nejvhodnější validační metody pro každou kombinaci proteinu, vzorku a aplikace.
Zjistěte více
Reprodukovatelnost
Kromě provedení důkladné validace je velmi důležité zajistit reprodukovatelnost protilátek. Každá nová šarže protilátky musí mít stejnou účinnost ve srovnání s předchozí šarží, aby bylo možné opakovat experimenty s použitím protilátky se stejnými výsledky. Ve společnosti Atlas Antibodies testujeme všechny nové šarže protilátek paralelně se stávajícími šaržemi na velkém souboru vzorků.
- Přečtěte si, jak zajišťujeme reprodukovatelnost protilátek
1 Skupina významných vědců ze Stanfordovy univerzity, Yaleovy univerzity, MIT, UCSD a NIH v USA, University of Toronto v Kanadě, EMBL v Německu, Niigata University v Japonsku a Science for Life Laboratory ve Švédsku, byla vytvořena za účelem vypracování formálních pokynů pro validaci a reprodukovatelnost protilátek, které budou výrobci protilátek používat pro standardizovanou validaci protilátek (Nature Methods, září 2016).